Salah satu fenomena universal yang dipamerkan oleh sebagian besar budaya adalah humor. Aspek utama dalam humor itu sendiri adalah menghibur dan membuat orang tertawa. Dewasa ini, penggunaan humor semakin meluas. Banyak jenis-jenis humor yang disampaikan ke khalayak bahkan melalui acara variety show, tetapi penggunaan humor pada media massa ini sering ditemukan penyimpangan yakni berbentuk humor seksis dimana wanita dengan bentuk tubuh ?seksi‘ dan berpakaian terbuka seringkali menjadi objeknya. Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui bagaimana representasi dari humor seksis pada program Tonight Show Net.Tv. Pada penelitian dengan metode kualitatif ini, subjek dari penelitian ini adalah program ?Tonight Show? di Net.Tv dan objek dari penelitian ini adalah humor seksis yang terkandung dalam program Tonight Show. Dan unit analisis penelitian ini adalah semiotika Roland Barthes dengan sub-analisis denotasi, konotasi dan mitos dimana semiotika digunakan untuk melihat makna representasi humor seksis dalam beberapa sudut pandang. Hasil dari penelitian ini menunjukkan humor seksis yang dilontarkan dalam program Tonight Show mengarah kepada wanita dengan tubuh ?seksi‘ dan berpakaian terbuka. Humor seksis pada program ini menjelaskan bahwa wanita tersebut kerap kali digambarkan sebagai sebuah benda yang mampu tergantikan dan memposisikannya sebagai objek seksual, dimana humor ini termasuk kedalam kategori humor agresif.
Kata Kunci: Humor Seksis, Roland Barthes, Tonight Show