Seiring dengan perkembangan teknologi saat ini, masyarakat mulai lebih sering menggunakan media sosial, salah satunya Twitter yang digunakan untuk saling mengirim dan menerima pesan serta berinteraksi satu sama lain. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan isi pesan berdasarkan content of message pada akun Twitter @persib, @simamaung dan @persibonline dengan menggunakan analisis uji varian satu jalan Kruskal-Walls. Data yang digunakan adalah data primer yang berasal dari kuesioner yang disebarkan kepada 400 responden yang merupakan followers dari akun @persib, @simamaung dan @persibonline. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat perbedaan berdasarkan content of message dilihat dari tiga sub variabelnya yaitu topic of the tweet (X1), the tweet post objectives (X2), dan the time of tweeting (X3) antara akun @persib, @simamaung dan @persibonline dengan nilai persentase akun @persib sebesar 77,23% dengan kategori tinggi, nilai persentase akun @simamaung sebesar 78,9% dengan kategori tinggi, dan nilai persentase akun @persibonline sebesar 83,2% dengan kategori sangat tinggi. Simpulan dari penelitian ini adalah terdapat perbedaan isi pesan berdasarkan sub variabel topic of the tweet dan the time of tweeting serta tidak terdapat perbedaan pada sub variabel the tweet post objectives pada akun Twitter @persib, @simamaung dan @persibonline.